- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本品是畢赤酵母（Pichia Pastoris）基因工程菌株，經(jīng)發(fā)酵培養、分離純化，再經(jīng)冷凍干燥得到的重組熱穩定胰蛋白酶粉末。該重組熱穩定胰蛋白酶是來(lái)源于尖孢鐮孢（Fusarium oxysporum）的蛋白酶，是一種絲氨酸蛋白酶，能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基末端所構成的肽鏈，具有重組豬胰蛋白酶、重組牛胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)。
本品屬于基因工程酶，不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑，具有與天然胰蛋白酶相同的活性和特異性。本品活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如PMSF和TLCK等、金屬離子螯合劑如EDTA等的抑制。與重組豬胰蛋白酶等不同，該重組熱穩定胰蛋白酶不易自切，配制為細胞消化液后可在2-8℃穩定存放。
- 產(chǎn)品優(yōu)勢
? 無(wú)動(dòng)物源性：無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染，安全性高。
? 不易自切，穩定性較高。
? 合規性：生產(chǎn)設備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規要求，符合 GMP 指導原則。
? 質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規支持文件。
- 產(chǎn)品特性
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項目
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特性
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來(lái)源
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尖孢鐮孢
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表達系統 |
畢赤酵母 |
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性狀
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白色或類(lèi)白色凍干粉
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酶活性 |
≥1000USP units/mg 粉 |
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比活性 |
≥2500USP units/mg蛋白 |
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蛋白含量 |
不低于30% |
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最佳pH |
8.5~9.5 |
| 溶解性 |
在緩沖液中溶解性良好 |
酶活定義： 25℃，pH7.6，反應體系3.0ml (1cm 光路)，每分鐘酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定義為一個(gè)USP單位。
- 推薦使用方法
【蛋白酶切】
1）將蛋白質(zhì)溶解在25mM Tris-HCl（pH7.0-10.0）緩沖液中。
2）將酶粉用1mM HCl（或25mM Tris-HCl，pH8.0）溶解，使酶液濃度為1-10mg/ml。
3）按照酶量：目的蛋白=1mg:50mg-1mg:500mg，或者酶量：目的蛋白=10U:1mg-100U:1mg,在pH 7.0-10.0條件下酶切。
【細胞消化】
1）取酶粉，用HBSS平衡液（或其他適宜細胞消化的緩沖液，如需要加入 EDTA 其終濃度推薦 0-1mM，最好不超過(guò) 2mM），配制為蛋白濃度0.1-0.3mg/ml（或者酶活濃度300U/ml-1000U/ml）的消化液，輕柔混勻。
2）使用 0.22μm 濾膜對上述胰蛋白酶溶液過(guò)濾并轉移至無(wú)菌容器中。
3）該消化液可當天按照要求直接使用（例如加入1ml至T25瓶，37℃消化細胞），也可在2-8℃條件下保存30天。（若需在2-8℃保存更長(cháng)時(shí)間，可購買(mǎi)我公司產(chǎn)品TrypRE select。或與我公司技術(shù)人員聯(lián)系。）
- 產(chǎn)品用途
# 用于生物藥物生產(chǎn)，如胰島素等。
# 用于各種類(lèi)型的細胞消化，如貼壁細胞的傳代消化；組織塊消化與原代細胞獲取；微載體培養細胞的消化；干細胞的消化；免疫細胞消化等。
- 運輸和儲存穩定性
運輸穩定性：冰袋保溫運輸，活性穩定。
儲存穩定性：儲存穩定性：凍干粉在-15℃及以下條件下至少能穩定存放24個(gè)月。 1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15℃及以下，反復凍融10次，無(wú)活性損失。
- 注意事項和免責聲明
? 本品具有吸濕性，應先平衡至室溫后再開(kāi)瓶取用。
? 本品僅供科研生產(chǎn)使用，不得用于人體。
