- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
腸激酶（Enterokinase, EK）是一種高度專(zhuān)一性識別 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在Lys的C 端水解多肽。具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)。可在較寬的pH范圍(4.5~9.5)和較寬溫度范圍內有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白質(zhì) N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標簽。冀百康重組腸激酶采用重組畢赤酵母高效分泌表達技術(shù)，經(jīng)多級層析純化，制成的高純度、高活性重組牛腸激酶，不含其他蛋白酶。
- 產(chǎn)品優(yōu)勢
? 無(wú)動(dòng)物源性：無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染，安全性高。
? 純度高，比活高。
? 生產(chǎn)規模 1000L 以上。
? 合規性：生產(chǎn)設備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規要求，符合 GMP 指導原則。
? 質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規支持文件。
- 產(chǎn)品特性
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性狀 |
淡黃.色、無(wú)色澄明液體 |
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酶活性 |
≥5.0U/μl
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ph值 |
7.0-9.0 |
| 純度 |
單一主條帶 |
| 電泳 |
25.8±2.6 kDa |
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宿主蛋白殘留 |
≤100ng/mg pro. |
| 外源性 DNA 殘留 | ≤100ng/mg pro. |
酶活定義：在 25℃，12~16 小時(shí)內，將 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0
緩沖液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量為 1U。
- 使用方法
【25℃酶切條件為】25mM Tris-HCl PH8.0 體系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白總量 50-100μg），重組 EK 0.1~0.2U,酶切 16~24 小時(shí)，用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。
【4℃酶切條件為】可在 4℃對底物進(jìn)行有效低溫酶切，但需要將酶切時(shí)間延長(cháng)至 48~64 小時(shí)，或增加 2-3 倍酶量。低溫酶切有時(shí)候可獲得比 25℃更好的酶切效果。 ? 在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響。可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切： 1） 為獲得理想酶切結果，請將樣品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 緩沖液中，再進(jìn)行酶切； 2） 若不便透析，可將樣品稀釋?zhuān)溥蚝吭?100mM 以下，NaCl 濃度在 50mM 以下，甘油濃度小于 5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即 1U 酶切 500μg 蛋白）； 3） 如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當增加酶量或延長(cháng)酶切時(shí)間，也可達到較好酶切效果。
可對酶切條件進(jìn)行優(yōu)化，例如緩沖液 pH，融合蛋白濃度，EK 的量，以及酶切時(shí)間，融合蛋白能在穩定條 件下被酶切，用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。
去除重組腸激酶的辦法：可使用胰蛋白酶抑制劑親和層析去除重組腸激酶。 注意：不建議 37℃條件下酶切，可能會(huì )有非特異性酶切出現。
- 運輸及穩定性
運輸穩定性：冰袋運輸，活性穩定。
儲存穩定性：-15℃及以下，24 個(gè)月穩定，25℃，一周內無(wú)活.性損失。緩沖體系：50mM Tris-HCl，pH8.0，
250mM NaCl，2mMCa2+，50%甘油。
凍融穩定性：反復凍融 5 次，無(wú)活性損失。
本品僅供研究使用，不得用于動(dòng)物或人類(lèi)的診斷或治療。
說(shuō)明：由于廣告法的緣故，部分違禁詞用同音字替換或使用符號來(lái)間隔，如有疑問(wèn)可以聯(lián)系我們提供詳細的產(chǎn)品信息。
